周 强
重庆市铜梁区中医院检验科 重庆市 402560
【摘 要】链球菌属微生物在最初进行分类的时候囊括有40 多种类别，后来在人们进行更加细致的分类后，有些种类就被排除了。所以目前的链球菌属被人们分成了6 个大群和30 个种类加上另外两个独立的类型。DNA 中的G+C 在链球菌所占的比例为34m0.1%-46m0.1%[1]。可以用来检验链球菌的学科有卫生微生物学和临床微生物学。下文我们将细致的介绍检验方法。
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关键词 链球菌属；临床；检验；反应
1 临床样本的采集和处理
1.1 病原体标本
从患者身上及可能受污染的环境和衣物中采集标本，并用无菌试管进行保存在进行检测。
1.2 临床标本
收集血液、脓液、分泌物等进行送检。
2 链球菌属微生物的分类
因为该菌属的种类十分多样，目前我们临床上大多都一直使用Lancefield 血清学的办法来对该菌群进行分群（A、B、C、D、F、G 等18 个群），除此之外我们还可以通过它们是否能够发生溶血的现象（溶血、溶血或草绿色溶血、溶血或不溶血）来进行大致的分类。临床上最常见的就是化脓性链球菌，它属于A 群且溶血的链球菌群[2]。
2.1 链球菌的形态与染色
革兰阳性球菌，它的固体培养基之上会呈现出单个或者成双的排列，很少会出现链状式的排列，它在肉汤的培养基中会出现长链状的排列，肺炎链球菌则会出现矛头状，成双出现或者是链状的排列。
2.2 培养特性
链球菌落在血琼脂平板上可呈现出三种不同的溶血现象：1. 溶血的周围出现灰绿色的狭窄的溶血环；2. 溶血的周围有较大的完全透明的溶血环；3. 溶血（没有溶血性）不发生任何溶血变化。肺炎链球菌的菌落是呈现中央有脐窝状、表面十分光滑、呈灰色又较为扁平，而且四周还伴有草绿色的溶血环同时出现。
2.3 生化反应
触酶试验后出现阴性，对许多的碳水化合物的分解因为菌种的不同而有不一样的反应，链球菌是不能够被胆汁所溶解的。
肺炎链球菌的胆盐溶菌的试验会呈现出阳性反应。
2.4 链球菌的鉴别方法及要点
（1）菌属自身特征：革兰阳性球菌，呈现出单个、成双或者是链状的排列，菌落个体比较小，可以出现溶血、溶血或不溶血的现象，触酶试验的结果为阴性。
（2）通过个体是否发生溶血及其他关键性的试验，对链球菌进行推测性的鉴定和大致分群。
A 群种类的链球菌（例如化脓性的链球菌）：出现溶血现象，对于杆菌肽敏感。
B群种类的链球菌（例如无乳链球菌）：菌落四周会出现溶血，在进行CAMP 试验时，会呈阳性；马尿酸钠试验时，也会呈阳性。
C 群种类的链球菌（例如兽疫链球菌和马链球菌等）：使用马尿酸钠、6.5% 氯化钠耐盐对其试验都会呈现为阴性。
D 群种类的肠球菌（例如粪肠球菌、鸟肠球菌等）：使用胆汁七叶苷、6.5% 氯化钠耐盐对其进行试验均为阳性，可以在45℃生长。现这一类整体归属于肠球菌属。
C、F 及G 群种类的链球菌都是使用最常见血清学方法来进行鉴别。
2.5 操作步骤
（1）涂片、染色，对菌落的特征进行观察，挑取可疑的菌落，再次涂片染色镜检。
（2）触酶试验，根据《触酶试验标准操作规程》进行操作。
（3）鉴定，随机的从血琼脂平板上提取出纯菌落，使用微生物的鉴定仪或传统生化反应对细菌进行细致的鉴定和深入的分析。
3 检验结果解释与分析
（1）草绿色的链球菌是在人体内的正常菌群之一，正常情况下是不会使人患病的，只有当草绿色的链球菌在血液等无菌体液中出现的时候，进行鉴定才有意义。
（2）如果通过检测，发现链球菌对青霉素十分敏感，链球菌霉素o 对于氧气相对敏感，而且它的抗原性特别强。同时该菌群有被认为对许多抗生素例如阿莫西林、头孢克洛、头孢唑林等头孢类药物极其敏感，则不需要再次进行上述的抗生素的药敏试验。如果通过检测发现，肺炎链球菌菌落的苯唑西林抑菌圈大于或等于19mm，就应该对其进行青霉素、头孢噻肟和头孢曲松的MIC 检测，因为者可能会出现青霉素的耐药或中介现象。如果通过检测，发现链球菌对红霉素敏感或者有耐药行，则说明该菌对克拉霉素、阿奇霉素、地红霉素敏感或者有耐药行。近年来因为对病原体和病菌对于抗生素例如青霉素、阿司匹林等产生了较强的抗药性，所以给我们对于病人的临床治疗带来了极大的困难。乙型链球菌它们对于青霉素、红霉素、四环素、杆菌肽和磺胺药等治疗性药物都特别的敏感，所以人们应该针对其各类特性研制出针对它们的药物或治疗手段。
4 临床意义
化脓性链球菌（A 群链球菌）它是造成人体出现化脓性感染的最主要病原菌中的一个，它的使人发病的能力也是所有链球菌中最强，它可以引起人们出现痈、蜂窝织炎、急性咽炎、丹毒、脓疱疮、猩红热、医源性伤口感染和产后感染等。而且感染了这类链球菌之后，也有可能引发生急、慢性风湿热和急性肾小球肾炎等严重的变态反应性并发症。无乳链球菌（B群链球菌）正常情况下他寄居于妇女阴道和人体肠道内，它的带菌率可达到30% 左右，这种菌会引起新生儿的感染。肺炎链球菌则寄生在健康人群的口腔、鼻咽部位，虽然它们属正常菌群，但是也会会引起人们的急性肺炎或者是支气管炎草绿色链球菌是人体上呼吸道正常菌群，通常不致病。
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参考文献
[1] 中国合格评定国家认可委员会.CNASGL23:2008 医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南.2008.
[2] 周庭银编著. 临床微生物学诊断与图解( 第二版)[M]. 上海：上海科学技术出版社，2007.
