正祥，邓 乐，张长青，周 燚
（长江大学农学院／湿地生态与农业利用教育部工程研究中心，湖北 荆州 ４３４０２５）
摘要：采用菌丝生长速率法测定了８种药剂及其混配剂对油菜菌核病菌（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）的室内毒力，旨在筛选有效防治核盘菌的药剂及其混配剂，为油菜菌核病的防治提供重要参考。结果表明，咪鲜胺锰盐对核盘菌的毒力最高，其ＥＣ５０值为０．０６７ ６ μｇ／ｍＬ；丙环唑次之，ＥＣ５０值为０．０９８ ９ μｇ／ｍＬ；菌核净、腐霉利、甲基硫菌灵、多菌灵、异菌脲ＥＣ５０值在０．１～０．５ μｇ／ｍＬ之间；百菌清的ＥＣ５０值为０．７０６ １ μｇ／ｍＬ。咪鲜胺锰盐和百菌清以配比２∶１时增效系数为２．１７９ ５，咪鲜胺锰盐与甲基硫菌灵以配比１∶３时增效系数为２．９５２ ７，咪鲜胺锰盐与菌核净以配比１∶１时增效系数为１．５３７ ２。在防治油菜菌核病时，建议轮换使用咪鲜胺锰盐、丙环唑单剂及上述筛选出的混配剂。
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关键词 ：油菜菌核病菌（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）；杀菌剂；毒力；混配剂
中图分类号：Ｓ４８２．２ 文献标识码：A 文章编号：0439－８114（２０15）07－1606-03
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.07.019
油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｎｕｐｓ Ｌ．）是我国的重要油料作物之一，种植面积和总产量均位居世界首位［１］。由核盘菌［Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ（Ｌｉｂ．）ｄｅ Ｂａｒｙ］侵染引起的油菜菌核病在油菜种植地区均有发生，在我国以长江流域和东南沿海地区最为普遍和严重，一般发病率为１０％～２０％，严重的达８０％以上［２－４］。由于油菜种质资源中缺少高抗菌核病的品种，目前生产上对于该病害的防治主要采用化学防治为主，辅以农业防治和生物防治［５］。国内虽然报道了不少防治油菜菌核病的化学药剂，如苯并咪唑类的多菌灵、亚胺类的菌核净、取代苯类的百菌清等，但长期使用单一的化学药剂，导致大量的抗性菌株产生，化学药剂的防治效果明显降低［６，７］。基于此，本研究根据药剂的不同作用机理，选取了８种药剂进行室内毒力测定，并测定了不同混配剂的毒力，以期筛选出对核盘菌具有较强抑制作用的单剂及混配剂，为油菜菌核病的防治提供理论依据。
１ 材料与方法
１．１ 材料
１．１．１ 供试菌株 油菜菌核病菌（Ｓ． ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ），由长江大学农学院植物病理研究室分离保存，于ＰＤＡ平板［８］上培养２ ｄ后使用。
１．１．２ 供试药剂 ７５％百菌清可湿性粉剂（ＷＰ）（广东中迅农科股份有限公司），４０％菌核净可湿性粉剂（ＷＰ）（山东科大创业生物有限公司），７０％甲基硫菌灵可湿性粉剂（ＷＰ）（四川省药化工有限公司），５０％腐霉利可湿性粉剂（ＷＰ）（上海知农化工有限公司），５０％异菌脲可湿性粉剂（ＷＰ）（江西禾益化工有限公司），５０％咪鲜胺锰盐可湿性粉剂（ＷＰ）（拜尔作物科学公司），２５％多菌灵可湿性粉剂（ＷＰ）（广东中迅农科股份有限公司），２５０ ｇ／Ｌ丙环唑乳油（ＥＣ）（瑞士先正达作物保护有限公司），均为市售商品药剂。
１．２ 方法
１．２．１ 不同单剂对核盘菌的毒力测定 采用菌丝生长速率法［９］，根据药剂的推荐剂量及预备试验结果，将供试的８种药剂配制成系列浓度的含药ＰＤＡ培养基。丙环唑、咪鲜胺锰盐、多菌灵的浓度为０．６、０．４、０．２、０．１、０．０５、０．０２５ μｇ／ｍＬ，百菌清的浓度为１．０、０．８、０．６、０．４、０．２、０．１ μｇ／ｍＬ，腐霉利的浓度为０．６、０．４、０．２、０．１、０．０５、０．０２５ μｇ／ｍＬ，异菌脲、菌核净、甲基硫菌灵的浓度为１．０、０．８、０．６、０．４、０．２、０．１、０．０５ μｇ／ｍＬ。用打孔器从ＰＤＡ培养基上取直径为５ ｍｍ的核盘菌菌饼，接种于含药ＰＤＡ平板中央，置于２５ ℃倒置培养，每处理重复３次。待对照菌落长满培养皿时，用十字交叉法测量菌落直径，取平均值，计算抑制率。以药剂浓度的对数值为横坐标，不同浓度下抑制率的几率值为纵坐标，绘制毒力曲线，求得８种杀菌剂对油菜菌核病菌的毒力回归方程、ＥＣ５０值和相关系数。
抑制率＝（对照菌落直径－处理菌落直径）／（对照菌落直径－菌饼直径）×１００％
１．２．２ 不同混配剂对核盘菌的毒力测定 参照文献［１０］，根据药剂单剂的毒力及作用机理，将咪鲜胺锰盐（Ａ）、百菌清（Ｂ）、甲基硫菌灵（Ｃ）、菌核净（Ｄ）进行两两配比，按质量比３∶１、２∶１、１∶１、１∶２、１∶３进行混配，三次重复。根据文献［１１］计算混剂的增效系数ＳＲ，ＳＲ≥１．５表示具有增效作用；ＳＲ≤０．５，表示具有拮抗作用；０．５＜ＳＲ＜１．５表示具有相加作用。
混剂的ＥＣ５０理论值＝（混剂中Ａ的质量分数＋混剂中Ｂ的质量分数）/（混剂中Ａ的质量分数/Ａ的ＥＣ５０＋混剂中Ｂ的质量分数/Ｂ的ＥＣ５０）
混剂的增效系数（ＳＲ）＝混剂的ＥＣ５０理论值/混剂的ＥＣ５０实际值
２ 结果与分析
２．１ 单剂对核盘菌的毒力
单剂对核盘菌的毒力测定结果如表１所示，从表１中可以看出，在供试的８种药剂中，咪鲜胺锰盐对油菜菌核病菌的毒力最大，其ＥＣ５０值为０．０６７ ６ μｇ／ｍＬ；其次是丙环唑，其ＥＣ５０值为０．０９８ ９ μｇ／ｍＬ；菌核净、腐霉利、甲基硫菌灵、多菌灵、异菌脲ＥＣ５０值在０．１～０．５ μｇ／ｍＬ之间；百菌清的毒力最小，其ＥＣ５０值为０．７０６ １ μｇ／ｍＬ。
２．２ 混配剂对核盘菌的毒力
不同混配剂的毒力测定结果如表２所示，由此可见，咪鲜胺锰盐（Ａ）和百菌清（Ｂ）混配时，增效系数（ＳＲ）在１．３４６ ６～２．１７９ ５之间，配比２∶１时增效系数最大，为２．１７９ ５；咪鲜胺锰盐（Ａ）与甲基硫菌灵（Ｃ）混配时，增效系数（ＳＲ）在１．５１１ １～２．９５２ ７之间，均表现增效作用，其中配比１∶３时增效系数最大，为２．９５２ ７；咪鲜胺锰盐（Ａ）与菌核净（Ｄ）混配时，配比１∶１时增效系数最大，为１．５３７ ２；其余药剂配比均表现相加作用。
３ 小结与讨论
本研究测定了８种药剂对油菜菌核病菌的室内毒力，结果表明，供试的药剂对核盘菌菌丝生长均具有一定的抑制作用，抑制作用依次为５０％咪鲜胺锰盐ＷＰ＞２５０ ｇ／Ｌ丙环唑ＥＣ＞２５％多菌灵ＷＰ＞ ５０％腐霉利ＷＰ＞４０％菌核净ＷＰ＞５０％异菌脲ＷＰ＞ ７０％甲基硫菌灵ＷＰ＞７５％百菌清可湿性粉剂ＷＰ。咪鲜胺锰盐和丙环唑对油菜菌核病菌的毒力较高，其余药剂的毒力较低，建议这两种药剂经田间防效验证后，可轮换用于油菜菌核病的田间防治。任莉等［１２］比较了核盘菌对咪鲜胺锰盐、多菌灵、多·酮及菌核·锰锌杀菌剂的敏感性，结果表明核盘菌对杀菌剂咪鲜胺锰盐高度敏感，而对其余３种杀菌剂敏感性稍差，本研究结果与此相一致。秦虎强等［１３］报道陕西汉中地区的油菜菌核病菌对咪鲜胺锰盐、腐霉利、异菌脲、多菌灵、甲基托布津、戊唑醇及菌核净的敏感性较强，其次为乙霉威与丙环唑，对百菌清中度敏感，本研究结果与此存在一定差别，推测原因可能与不同地区油菜菌核病菌的抗药性有关，有待于进一步研究。
长期使用单一药剂易造成病原菌的抗药性，使用混配剂可达到比单剂更为理想的防治效果，减少病原菌抗药性产生的风险。周锋等［１４］报道戊唑醇和菌核净以配比为１∶２０、５∶４４、５∶２６、１０∶３３、５∶１１、１５∶２２、１２∶１１、２０∶１１和２１∶５复配后对油菜菌核病病原菌具有增效作用，且当二者配比为１２∶１１时增效系数最高。本研究选取了毒力强且作用机理不同的４种药剂进行两两混配，联合毒力测定结果表明，咪鲜胺锰盐与百菌清配比２∶１、咪鲜胺锰盐与甲基硫菌灵配比１∶３、咪鲜胺锰盐与菌核净配比１∶１时都具有明显的增效作用。本研究筛选的增效作用明显的混配剂，不仅可以明显提高药剂的杀菌效果，而且有利于防止或延缓病菌抗药性的产生，为开发防治油菜菌核病的混配制剂提供了重要的参考依据。
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