陈英，刘江娜，张爱萍*
（兵团第六师农科所，新疆五家渠831300）
摘要：本文在每年更换1次新的培养基的条件下，通过对试管苗和试管薯保存中进行的低温处理和生长抑制剂使用，最大限度减少繁殖的代数，达到了有效延长被储存材料的存活率的目的。
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关键词 ：马铃薯克新一号；试管苗；试管薯；资源保护
与实生种子繁殖作物不同，马铃薯依靠块茎繁殖，其资源的利用具有特殊性。由于感染的马铃薯材料很难长期保存，因此，无毒苗在基因资源使用、种质保存及国内、国际间的交流具有重要的作用[1]。马铃薯种资资源的搜集、引进、鉴定创新和利用一直被马铃薯育种者所重视[2]，但我国马铃薯资源过去采用“春播-秋收-冬窖藏”的田间保存方式，这种方式不仅需要消耗大量的人力、物力、财力，还受到各种灾害和人为因素的制约，导致资源混杂、遗失。实践证明，利用生物技术通过茎尖培养，将马铃薯资源转育成试管苗和试管薯保存，这种离体培养保存技术可避免田间病虫害的侵袭和资源流失，可从根本上解决马铃薯退化的问题，具有占用空间小、成本低、体积小、重量轻、易贮藏和运输及种植方便等优点，在马铃薯脱毒苗繁殖、种质保存、种子交换等方面具有重要意义[3]。单纯用试管苗，保存2年后会出现明显的退化，剪切7代以上苗的生长势会明显降低，且细菌污染严重，较难剔除，采用试管苗、试管薯、块茎3种保存方式相结合，是马铃薯种资资源保存行之有效的方式。本试验通过对试管苗、试管薯保存过程中低温处理和生长抑制剂的使用，在每年更换1次培养基的条件下，以提高储存材料的存活率[6]。保存的两头用试管苗，中间用试管薯，以最大限度减少繁殖代数，达到长时间保存马铃薯种质资源的目的。
1材料与方法
1.1材料
选用马铃薯克新一号种薯，高温与茎尖脱毒相结合，采用PCR方法和酶联双抗体夹心法（ELISA）对主要病毒病和类病毒病（PSTV）进行检测，对不带病毒的试管苗根据需要扩繁2次，从中取出1/2数量的试管苗用液体培养方法壮苗20d，再转到诱导培养基中诱导结薯。
1.2方法
1.2.1试管苗保存方式
采用低温和常温两种保存方式，分别在培养基中加入不同浓度的甘露醇（10g/L、20g/L、30g/L、40g/L）（表1），每个处理10瓶，重复3次。
1.2.2试管薯保存方式
在无菌状态下，先将带有4~6节的叶色浓绿、茎秆粗壮、根系发达的脱毒试管苗剪去茎尖及根系，再剪切成1.5cm的茎段，转接到盛有30mL的液体培养瓶中，每瓶5茎段。瓶苗放在光照强度2000~3000Lx，光照时间16h/d，温度20~25°C的条件下培养18d，待试管苗长至4~6节壮苗时转入诱导培养基瓶中，全黑暗条件下，温度18~22°C，湿度65%~80%，静止培养5~6周，待试管薯不再增大、培养基较少、表皮有些老化时采收。试管薯收获后用清水冲洗表皮，并迅速用吸水纸吸干水分，2d后分别放到4°C、10°C、18~20°C、28~30°C环境中，观察休眠时间（见表2）。
2结果与分析
2.1温度和抑制剂对克新一号试管苗生长的影响
从表3可以看出，试管苗培养基中加入甘露醇，无论在低温还是常温条件下，对试管苗均有很好的抑制作用。但甘露醇浓度过高，会使试管苗节间过短，叶片密集，给繁殖剪切苗带来不便。
2.2温度对克新一号试管薯保存时间的影响
从表4可以看出，不同温度条件下试管薯的休眠时间不同，温度低休眠时间长，温度高休眠时间短。
3小结
无病毒马铃薯品种需经过脱毒和检测等方面的处理才能获得，因此代价较高，可采用试管苗和试管薯在室内保存同时并用，即先将试管苗在加入甘露醇培养基中低温（3~4℃）保存10个月，然后取出繁殖1次，再诱导试管薯并保存10个月，2年共繁殖3次，可大大降低繁殖次数。通过建立合理的良种繁育体系，大幅度提高马铃薯产量和质量。
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参考文献
[1]孙敬山，朱至清.植物细胞工程实验技术[M].北京：化工工业出版社，2006.
[2]刘喜才，张丽娟，孙邦升，等.马铃薯种资资源研究现状与发展对策[J].中国马铃薯，2007（1）：39-47.
[3]孙海宏，周运.马铃薯种资资源保存方法[J].现代农业科技，2008（12）：94.
