郭世保１，２，陈俊华１，史洪中１，陈利军１，智亚楠１
（１．信阳农林学院农业科学系，河南 信阳 ４６４０００； ２．信阳市无公害植物保护工程技术研究中心，河南 信阳 ４６４０００）
摘要：采用菌落直径法测定８种杀菌剂对山茶刺盘孢（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｃａｍｅｌｌｉａｅ Ｍａｓｓｅｅ）的毒力并进行田间药效试验。结果表明，山茶刺盘孢对嘧菌酯、咪鲜胺、多菌灵、三唑酮、苯醚甲环唑和甲基托布津高度敏感，其抑制中浓度（ＥＣ５０）为０．０９２ ４～２．１６３ ３ μｇ／ｍＬ；对百菌清和代森锰锌为中度敏感，其ＥＣ５０分别为５．１１５ ０ μｇ／ｍＬ和１１．３３１ ５ μｇ／ｍＬ。田间药效试验结果表明，４５％咪酰胺ＥＷ（３７５ ｇ／ｈｍ２）的防效最高，达到９１．３２％；其次为２５％嘧菌酯ＳＣ（１５０ ｇ／ｈｍ２）和８０％多菌灵ＷＰ（６７５ ｇ／ｈｍ２），其防效分别达到８６．６３％和８０．５５％；８０％甲基托布津ＷＰ（５００ ｇ／ｈｍ２）的防效最低，为６３．４５％。
教育期刊网 http://www.jyqkw.com
关键词 ：茶树；山茶刺盘孢（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｃａｍｅｌｌｉａｅ Ｍａｓｓｅｅ）；毒力测定； 防治效果
中图分类号：Ｓ４３１ 文献标识码：A 文章编号：0439－８114（２０15）05－1102-03
DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.05.018
收稿日期：２０１４－０５－０４
基金项目：河南省科技成果转化项目（１１２２０１１１００１９）；河南省科技攻关项目（１４２１０２１１０１１３）
作者简介：郭世保（１９７６－），男，河南信阳人，讲师，博士，主要从事植物病理学研究，（电话）３４６２００２３３４（电子信箱）ｓｂｇｕｏ５１０＠１６３．ｃｏｍ。
茶树云纹叶枯病是由山茶刺盘孢（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｃａｍｅｌｌｉａｅ Ｍａｓｓｅｅ）侵染引起的一种广泛发生的病害［１］。该病在不同的季节均有发生，以老叶发病较重［２］。茶树云纹叶枯病也是河南省茶园发生最普遍、危害最严重的病害。特别是秋季人工修剪后的茶园，常使茶树叶片大量脱落，严重影响茶叶的产量和品质［３］。茶叶是河南省的主要经济作物之一，信阳是其主产地，种植面积１４万ｈｍ２，产量占全省茶叶总产量的９０％，约占全国茶叶总产量的２％［４，５］。
探求生产上更直接、简便、经济、高效的防治药剂和方法措施，对于茶树云纹叶枯病的防治具有重要意义。喷洒化学药剂仍是目前防治茶树云纹叶枯病最直接、最简便的方法，同时也是最有效的防治方法。本研究采用菌落直径法，在室内测定８种杀菌剂对茶树云纹叶枯病菌（山茶刺盘孢）的毒力，并根据室内毒力测定结果，选择对茶树云纹叶枯病菌毒力强的杀菌剂进行田间防效试验，旨在为茶树云纹叶枯病的化学防治提供依据。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
１．１．１ 供试菌株 山茶刺盘孢菌株（编号ＥＲＣ４－９－６）于２０１２年采自河南省信阳市平桥区发病的茶树叶片，常规组织分离，置常规ＰＤＡ平板上纯化后，于２５ ℃恒温培养箱中培养保存。
１．１．２ 供试药剂 ２５％嘧菌酯ＳＣ，先正达（中国） 投资有限公司生产；４５％咪鲜胺ＥＷ，江苏瑞德邦化工科技有限公司生产，１５％三唑酮ＷＰ，江苏建农农药化工有限公司生产；２５％苯醚甲环唑ＥＣ，河南信阳富邦化工股份有限公司生产；７０％甲基托布津ＷＰ和８０％多菌灵ＷＰ，河北冠龙农化有限公司生产；７０％代森锰锌ＷＰ，山东金正农药有限公司生产；５０％百菌清ＷＧ，百农思达（北京）农用化学品有限公司生产。
１．２ 试验方法
１．２．１ 药剂质量浓度梯度的设置 根据预试验的结果，嘧菌酯、咪鲜胺和多菌灵分别设１．００、０．５０、０．２５、０．１０、０．０５ μｇ／ｍＬ ５个浓度梯度；三唑酮、苯醚甲环唑和甲基托布津分别设５．００、２．５０、１．２５、０．５０、０．２５、０．１0 μｇ／ｍＬ ６个浓度梯度；代森锰锌和百菌清分别设２０．００、１０．００、５．００、２．５０、１．２５、０．５０、０．１０ μｇ／ｍＬ ７个浓度梯度。
１．２．２ 含药培养基的制备 用移液器量取不同质量浓度供试药剂溶液，加入提前熔化好的 ＰＤＡ 培养基，混匀后倒入培养皿中。用直径５ ｍｍ打孔器从菌落边缘切取菌块，移接于含药不同的ＰＤＡ平板中央。以不含药的培养基为对照，各处理重复３次，以上操作在无菌操作台上进行。置于２５ ℃恒温培养箱中培养５ ｄ 后观测各处理菌落生长情况，十字交叉法测量菌落直径［６］，计算抑菌率。
以供试药剂浓度的对数值ｘ为自变量，以抑菌率几率转换值ｙ为因变量，求出各药剂的毒力回归方程，计算各药剂对菌株的抑制中浓度（ＥＣ５０）［７］。ＥＣ５０＜５ μｇ／ｍＬ为高度敏感；５ μｇ／ｍＬ≤ＥＣ５０＜２０ μｇ／ｍＬ为中度敏感；ＥＣ５０≥２０ μｇ／ｍＬ为不敏感。
１．２．３ 田间药效试验 依据室内毒力测定结果，选择对茶树云纹叶枯病菌毒力较强６种药剂进行田间药效试验。在信阳市浉河区车云山茶场进行试验，６月下旬和７月下旬各喷药１次。采用工农－１８型背负式手动喷雾器进行喷雾，药液均采用２次稀释法配制，喷施药液量７５０ Ｌ／ｈｍ２。试验设４５％咪酰胺ＥＷ为３７５ ｇ／ｈｍ２、２５％嘧菌酯ＳＣ为 １５０ ｇ／ｈｍ２、８０％多菌灵ＷＰ为６７５ ｇ／ｈｍ２，１５％ 三唑酮为ＷＰ ６０ ｇ／ｈｍ２、２５％苯醚甲环唑ＥＣ为 １２５ ｇ／ｈｍ２、８０％甲基托布津ＷＰ为 ５００ ｇ／ｈｍ２、清水空白对照，共计７个处理。各处理间随机排列，重复３次，各处理区面积为３０ ｍ２。防效调查：每个小区定点选取５株，每株随机检查中上部植株叶片２０张，在施药前和药后１４ ｄ，分级调查病叶数、病斑面积，计算病叶率、病指及防效。云纹叶枯病病情指标参照高旭丽［８］方法，病情指数及防治效果计算公式如下：
２ 结果与分析
２．１ ８种杀菌剂对山茶刺盘孢的毒力
８种杀菌剂对山茶刺盘孢的毒力回归方程、相关系数（ｒ）、抑制中浓度（ＥＣ５０）和９５％置信限如表１所示。由表１可知，山茶刺盘孢对测定的８种药剂均表现敏感，其ＥＣ５０在０．０９２ ４～１１．３３１ ５ μｇ／ｍＬ之间。其中嘧菌酯、咪鲜胺、多菌灵、苯醚甲环唑、三唑酮和甲基托布津的ＥＣ５０均小于５．０ μｇ／ｍＬ，表现为高度敏感。尤其是嘧菌酯、咪酰胺和多菌灵的敏感性最强，其ＥＣ５０均小于０．５ μｇ／ｍＬ。百菌清和代森锰锌为中度敏感（５ μｇ／ｍＬ≤ＥＣ５０＜２０ μｇ／ｍＬ）。
２．２ 田间药效试验
选择对山茶刺盘孢高度敏感的６种药剂进行田间药效试验，结果见表２。从表２可知，６种药剂对茶树云纹叶枯病均有一定的防效，但不同处理间存在差异。以４５％咪酰胺ＥＷ的防效最好，达到９１．３２％；其次为２０％嘧菌酯ＳＣ和８０％多菌灵ＷＰ，其防效分别达到８６．６３％和８０．５５％。以上３种药剂的防效都达到８０％以上，其中２０％嘧菌酯ＳＣ和８０％多菌灵ＷＰ防效差异不显著，但后者与４５％咪酰胺ＥＷ防效差异显著。１５％三唑酮ＷＰ和２５％苯醚甲环唑ＥＣ的防效分别为７５．７９％和７３．８５％，均超过７０％，也有较好的防效。８０％甲基托布津ＷＰ防效最低，为６３．４５％，显著低于其他５种药剂。
３ 小结与讨论
河南信阳地区的山茶刺盘孢（茶树云纹叶枯病菌）对嘧菌酯、咪酰胺、多菌灵、三唑酮、苯醚甲环唑、甲基托布津表现高度敏感；对百菌清和代森锰锌表现中度敏感。其中嘧菌酯、咪酰胺和多菌灵的抑制中浓度（ＥＣ５０）均小于０．５ μｇ／ｍＬ，表现极强的敏感性；选择其中表现高度敏感的６种药剂进行田间药效试验，结果表明６种药剂对茶树云纹叶枯病均有一定防效。其中咪酰胺的防效最高，为９１．３２％，可考虑做为河南目前及今后防治茶树云纹叶枯病的特效药剂。嘧菌酯和多菌灵的田间防效较为理想，均达８０％以上，也可做为防治该病的常规药剂。三唑酮是一种内吸性较强的三唑类杀菌剂，持效期长。苯醚甲环唑属于保护和治疗性杀菌剂。两者的防效均在７０％以上，也可作为防治茶树云纹叶枯病的轮换药剂使用。甲基托布津防效不理想，并显著低于其他５种药剂，其原因可能与其产品剂型、质量及施药浓度等有关，也可能是信阳地区在云纹叶枯病防治中长期、单一施用甲基托布津（调查中发现），使病菌产生了一定程度上的抗药性。甲基托布津和多菌灵同为苯并咪唑类杀菌剂，其作用机理都是干扰真菌的细胞分裂［９，１０］，两者可产生交互抗性［１１］，这在茶树云纹叶枯病的防治上应当引起足够的重视。
教育期刊网 http://www.jyqkw.com
参考文献：
［１］ 王志坤，谭万忠，张克诚，等．茶树云纹叶枯病病原鉴定及其生物学特性研究［Ｊ］．河南农业科学，２００８（４）：６７－６９．
［２］ 高旭晖，郑高云，梁丽云，等．茶云纹叶枯病病原菌侵入与叶位关系研究［Ｊ］．植物保护，２００８，３４（２）：７６－７９．
［３］ 卢东升，王金平，谢正萍．豫南茶树叶部真菌病害及病原鉴定［Ｊ］．河南农业科学，２００８（８）：９５－９８．
［４］ 龚 新，袁国强．信阳茶区茶叶生长的生态环境浅析［Ｊ］．地域研究与开发，１９９８，１７（４）：９４－９６．
［５］ 袁国强，邱士可，刘荷芬．河南省信阳茶业可持续发展能力评价［Ｊ］．河南农业科学，２００６ ２４（５）：７６８－７７０．
［６］ 苏 丹，傅俊范，周如军．白头翁叶斑病菌对７种杀菌剂的敏感性测定［Ｊ］．湖北农业科学，２０１２，５１（１０）：２０１４－２０１５．
［７］ 秦虎强，陈芳颖，付鼎程，等．油菜菌核病菌对１０种杀菌剂的敏感性及不同药剂田间防效［Ｊ］．西北农林科技大学学报（自然科学版），２０１１，３９（７）：１１７－１１２．
［８］ 高旭丽．茶园病害调查方法的研究［Ｊ］．茶业通报，１９９３（４）：２５－２６．
［９］ 李 洋．辽宁葡萄炭疽病菌对多菌灵抗药性研究［Ｄ］．兰州：甘肃农业大学，２００９．
［１０］ 徐汉虹．植物化学保护［Ｍ］．北京：中国农业出版社，２００７．
［１１］ 叶 佳，张传清．葡萄炭疽病菌对甲基硫菌灵、戊唑醇和醚菌酯的敏感性检测［Ｊ］．农药学学报，２０１２，１４（１）：１１１－１１４．
（责任编辑 张毅）
