顾雅君１，刘建荣１，石 楠１，温秀荣２，王世英３
（１．河北大学生命科学学院，河北 保定 ０７１００２；２．保定职业技术学院，河北 保定 ０７１０５１；
３．河北农业大学生命科学学院，河北 保定 ０７１００１）
摘要：研究了０．２％Ｔｕ－２制剂对肉兔肠道消化酶活性及生长性能的影响，进一步探讨酶对肉兔的作用机理，为该制剂的生产和应用提供试验依据。选用体格健壮、体重基本相同的３５日龄肉兔１２０只，随机平均分成对照组和试验组两组。对照组自始至终饲喂基础日粮，试验组３５～５９日龄在基础日粮中添加０．２％ Ｔｕ－２制剂，然后停止添加Ｔｕ－２制剂。观察并记录肉兔粪便中４种消化酶活性变化规律和生长情况。结果表明，添加０．２％Ｔｕ－２制剂后，肉兔粪便中纤维素酶、蛋白酶、α－淀粉酶和脂肪酶的平均酶活力比对照组提高幅度分别为３６．６５％、３１．８１％、２０．９９％、２３．０８％。平均增重提高１６．４０％，料重比降低１４．１５％。但当停饲Ｔｕ－２制剂后，试验组中肉兔各项指标又逐渐接近对照组。由此可以说明，Ｔｕ－２制剂可以改善肉兔肠道内生态环境，提高肉兔肠道多种消化酶活性，增加饲料转化率，改善肉兔的生长性能。
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关键词 ：肉兔；０．２％Ｔｕ－２制剂；消化酶；生长性能
中图分类号：Ｓ８１６．７ 文献标识码：A 文章编号：0439－８114（２０15）07－1641-03
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.07.028
兔肉具有高蛋白质、高赖氨酸（占蛋白质的９．６％左右）、高消化率、高烟酸；低脂肪（４．９％）、低胆固醇、低热量等特点。近１０多年来，兔肉已成为发达国家人们的时兴肉食品。随着国内人们生活水平的不断提高，国外的大量需求，肉兔养殖将在中国蓬勃发展。如何提高兔肉的质量和数量是当前面临的难题之一。
肉仔兔消化系统尚未完全发育，消化酶分泌不足，导致饲料利用率低，在其饲料中添加外源性的益生素，可促进兔肠道中消化酶的分泌。
益生素（Ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ）又称微生态制剂，可促进动物的消化吸收，是提高饲料转化率的一种有效途径［１－４］。酶是生物催化剂，不仅可提高饲料利用率而且对畜禽产品无毒副作用，在许多方面益生素克服了抗生素作为饲料添加剂所带来的不良影响［５－９］，没有污染更有利于环镜保护。Ｔｕ－２制剂就是这样的微生态制剂，在肉兔肠道中可提高部分消化酶活性、增加有益菌数量及对兔有良好的促生长性能，这些都将日益受到众多用户的关注。
国内也有关于用益生素提高肉兔生长性能等方面的相关报道，例如石传林等［１０］用益生素饲喂９０ ｄ后，可使肉兔的体重提高１５．２％，差异显著。此外益生素对鸡、猪、牛的作用也有很多类似报道［１１－１６］，但对其机理都未进行全面而更加深入的分析研究。
Ｔｕ－２制剂主要是从健康肉兔肠道中分离筛选得到的以枯草芽孢杆菌为主的益生菌株，当加入到肉兔肠道中后，在一定时间内可提高消化酶活性。
本试验通过测定比较供试肉兔的生长增重情况及粪便中消化酶活力，进一步研究Ｔｕ－２制剂对肉兔肠道消化酶的作用及变化规律。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
Ｔｕ－２制剂：是从肉兔肠道中分离、筛选枯草芽孢杆菌Ｔｕ－１基础上进一步分离筛选、发酵制备而成，简称Ｔｕ－２制剂或Ｔｕ－２菌株。
试验动物：购自北京新西兰肉兔养殖场，从大庄兔养殖基地购买。
饲料：大庄兔养殖基地提供，基础日粮组成与营养水平见表１所示。
１．２ 肉兔饲喂管理及取样方法
选取３５日龄肉兔１２０只，随机平均分成对照组和试验组。试验组１～２５ ｄ（肉兔３５～５９日龄））在基础日粮中添加０．２％Ｔｕ－２制剂，对照组则自始至终不加Ｔｕ－２制剂。单笼饲养，内外环境一致，每天定时添料，记录各组的采食量和兔重量，饲养７５ ｄ出栏。分别在试验第１、２５、４０天时准确称重并精确计算肉兔耗料重量、增重量和料重比。采集对照组和试验组新鲜粪便样品于灭菌牛皮纸袋中，肉兔在前１～１０ ｄ（３５～４４日龄）每天取样１次， １１～２５ ｄ时每３ ｄ取样１次，之后每５ ｄ取样一次。测定粪便中的４种消化酶活力的变化情况。
１．３ 待测酶液的制备及测定
准确称取２．５ ｇ肉兔粪便（对照组和添加组）分别放于小烧杯中，加入１％氯化钠和不同酶最适ｐＨ的磷酸盐缓冲溶液共计１０ ｍＬ，浸泡４０～５０ ｍｉｎ（期间不断搅拌），然后１０ ０００ ｒ／ｍｉｎ冷冻离心１０ ｍｉｎ，吸取上清液各１ ｍＬ，即为待测酶液。分别测定纤维素酶、蛋白酶、α－淀粉酶和脂肪酶的活力（在测定酶过程中光密度吸收值高低可通过稀释、浓缩或增减待测酶液量，使光密度吸收值处于仪器所在最适测定范围内），测定方法参照文献［１７－２1］。
２ 结果与分析
２．１ ０．２％Ｔｕ－２制剂对肉兔粪便中消化酶活力的影响
由图１可知，肉兔饲料中添加０．２％Ｔｕ－２制剂后，与对照组比较，试验组粪便中的纤维素酶、蛋白酶、α－淀粉酶和脂肪酶活力均逐日提高，第７天两组的差异达到最大值，且在第８～２５天这些差异保持基本稳定。２５ ｄ后（即停饲Ｔｕ－２制剂后）试验组酶活力又逐渐降低（两组的酶活力逐渐接近）。以第８～２５天的平均酶活计算，试验组肉兔粪便中的纤维素酶、蛋白酶、α－淀粉酶和脂肪酶的平均酶活力比对照组分别提高了３６．６５％、３１．８１％、２０．９９％、２３．０８％。
２．２ ０．２％Ｔｕ－２制剂对肉兔生长的影响
从表２可知，在试验组肉兔中添加饲喂０．２％Ｔｕ－２制剂阶段（即１～２５ ｄ），试验组比对照组平均增重提高１６．４０％，料重比降低１４．１５％。当停饲Ｔｕ－２制剂后（即试验第２６~40天），试验组比对照组平均增重仅提高６．８１％，料重比降低６．３０％。
３ 小结与讨论
０．２％Ｔｕ－２制剂作为外源性消化酶具有提高肉兔肠道纤维素酶、蛋白酶、α－淀粉酶和脂肪酶等消化酶活力的特性，因而Ｔｕ－２制剂的芽孢在肉兔肠道内萌发增殖后可提高一些消化酶活力。试验结果表明，添加０．２％Ｔｕ－２制剂后，肉兔粪便中纤维素酶、蛋白酶、α－淀粉酶和脂肪酶的平均酶活力比对照组有所提高。肉兔平均日增重显著增加，说明饲料转化率提高。试验中发现０．２％Ｔｕ－２制剂对肉兔粪便各种酶活力的影响具有一定规律：试验前期，随着天数的增加试验组粪便的各种酶活力逐渐增加，第７天达到较高水平，第８～２１天酶活力的变化比较平稳。有报道称微生态制剂在动物体内的定植需要６～７ ｄ［１２］，Ｔｕ－２芽孢杆菌制剂在肉兔肠道内的作用规律与之相符，故从试验第８天开始计算试验组和对照组平均酶活力并进行比较，这些变化均与肠道中一些消化酶活力的提高息息相关。
停止饲喂０．２％Ｔｕ－２制剂后，试验组粪便中消化酶活力又逐渐接近于对照组，应长期不间断添加。这与Ｌｅｅ等［２２］的研究报道相类似，即用芽孢杆菌饲喂肉兔可以促进肠上皮细胞的生长，提高小肠绒毛长度，改善肠道黏膜形态，提高对养分的吸收能力。本研究指出Ｔｕ－２制剂在肉兔消化道中定植不稳定，不能成为肉兔肠道的常驻菌群，若单独使用这种基础饲料，很难满足肉兔的用量。该结果表明０．２％Ｔｕ－２制剂在应用时应长期不间断地添加。
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