何 欢 祁宝辉 金红梅 黄彩萍
（遵义医学院珠海校区生物工程系，广东 珠海 519041）
【摘 要】以2，3，4-三氟苯甲酸为起始原料，经硝化、氨解、酯化、缩合、甲基化、环合、水解、氯代等反应合成了司美替尼，收率由13.1%提高至19.2%。其结构经1H NMR和MS确证。
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关键词 司美替尼；合成；工艺改进
※基金项目：贵州省科学技术基金计划（黔科合J字[2014]2181号）；遵义医学院硕士启动基金项目（F-665）。
作者简介：何欢（1983—），女，汉族，吉林吉林人，硕士，助理实验师，主要从事药物合成的研究。
通讯作者：祁宝辉，博士，副教授。
司美替尼（Selumetinib， 1），化学名称为5-[（4-溴2-氯苯基）氨基]-4-氟-N-（2-羟基乙氧基）-1-甲基-1H-苯并咪唑-6-甲酰胺，由英国AstraZeneca公司研发，用于治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）。司美替尼主要通过调控Ras-Raf-MEK-ERK 通路中关键蛋白激酶MEK水平来抑制包括具B-Raf-突变的黑色素瘤和具K-Ras突变的非小细胞肺癌（ NSCLC） 在内的多种肿瘤的生长[1]。目前，司美替尼正处于治疗非小细胞肺癌的Ⅲ期临床试验。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
Agilent 1100四级杆液质联用仪（美国Agilent公司），Bruker ARX-300核磁共振仪（德国Bruker公司）。所用其他原料及试剂均为化学纯或分析纯。
1.2 合成
文献报道的司美替尼的合成路线是以2，3，4-三氟苯甲酸为起始原料，经硝化、氨解、酯化、还原、环合、甲基化、水解、缩合等反应制得。鉴于该方法中存在着一些不足之处，本文对原工艺路线进行了改进优化。本文所确定的合成路线中部分关键中间体和原工艺类似，但合成方法完全不同，在操作简便性、安全性、收率等方面均有所改进提高，如图1所示。
（１）4-氨基-2，3-三氟-5-硝基苯甲酸2的合成 0 ℃下，将34 mL发烟硝酸缓慢加入至350 mL浓硫酸中，充分搅拌。保持0 ℃，滴加100 g 2，3，4-三氟苯甲酸的二氯甲烷溶液，滴毕，室温搅拌1 h。将反应物倒入至1 L冰水混合物中，二氯甲烷萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，蒸干溶剂得黄色油状液体，正己烷固化，得灰黄色固体113.8g。
将100 g上述产物悬浮于200 mL水中，保持0 ℃，滴加230 mL氨水，滴毕，室温搅拌约3 h。调pH至3-4，抽滤，滤饼干燥后得黄色固体88.7 g，收率为88.7 %。MS （ESI） m/z: 217.1（M-H）。
（２）4-氨基-2，3-三氟-5-硝基苯甲酸乙酯3的合成 室温下，将80 g中间体2加入至200 mL无水乙醇中，加入8 mL浓硫酸，回流5 h。蒸干溶剂，将残留物加入至120 mL水中，调pH至8-9，抽滤，滤饼干燥后得黄色固体75.7 g，收率83.9 %。MS （ESI） m/z: 247.3（M+H），269.2（M+Na）。
（３）4-氨基-3-三氟-5-硝基-2-（2-氯-4-溴苯基氨基）-苯甲酸乙酯4的合成 将50 g中间体3和247.2 g 2-氯-4-溴苯胺加入至250 mL二甲苯中，回流20 h。反应液冷却至0 ℃，抽滤，得黄棕色固体约86 g。得黄色固体70.1 g，收率为79.7 %。MS （ESI） m/z: 431.8、433.7（M+H）。
（４）2-（2-氯-4-溴苯基氨基）-4-（（（二甲氨基）亚甲基）氨基）-3-氟-5-氨基苯甲酸乙酯5的合成 将50 g中间体4加入至300 mL DMF-DMA中，回流10 h。蒸去溶剂，得浅棕色油状液体，加入乙酸乙酯-正己烷，充分搅拌，抽滤，得淡黄色固体39.9 g。
将30 g上述产物加入至150 mL 95%的EtOH-H2O溶液中，50 ℃下分批加入10.3 g还原铁粉，再加入1 mL浓盐酸，回流2 h。趁热抽滤，滤液冷却至0 ℃，抽滤，得米白色固体23.7 g，收率为84.3%。MS （ESI） m/z: 457.0、459.1（M+H）。
（５）2-（2-氯-4-溴苯基氨基）-4-（（（二甲氨基）亚甲基）氨基）-3-氟-5-甲氨基苯甲酸乙酯6的合成 将20 g中间体5加入至200 mL二氯甲烷中，依次加入15.2 mL三乙胺和10.1 g 2-硝基苯磺酰氯，加毕，室温搅拌6 h。水洗，蒸干溶剂，得土黄色固体26.9 g。
将20 g上述产物溶于100 mL干燥的DMF中，加入12.2 g Cs2CO3和2.1 mL MeI，60 ℃搅拌5 h。加入50 mL水，二氯甲烷萃取，合并有机相，蒸干得黄色油状液体。将上述液体加入至200 mL乙腈中，再加入18.2 g Cs2CO3及20 g聚苯乙烯-苯硫酚树脂，室温下搅拌12 h。抽滤，蒸干溶剂，得米白色固体13.4 g，收率91.4 %。1H NMR （300 MHz， DMSO-d6）: δ 7.56 （d， 1H）， 7.52 （s， 1H）， 7.23 （dd， 1H）， 6.63 （s， 1H）， 6.42 （dd， 1H）， 3.96 （q， 2H）， 3.06 （s， 6H）， 3.12 （s， 3H）， 1.33 （t， 3H）。MS （ESI） m/z: 471.2、473.2（M+H）。
（６）5-（2-氯-4-溴苯基氨基）-4-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-苯甲酸乙酯7的合成 将10 g中间体6加入至120 mL乙腈中，回流9 h。蒸干溶剂，得土黄色固体，无水乙醇重结晶，得淡黄白色固体6.7 g，收率为73.7 %。1H NMR （300 MHz， DMSO-d6）: δ8.28 （s， 1H）， 7.79 （s， 1H）， 7.56 （d， 1H）， 7.24 （dd， 1H）， 6.41 （dd， 1H）， 3.86 （s， 3H）， 3.96 （q， 2H）， 1.34 （t， 3H）。MS （ESI） m/z: 426.1、428.1（M+H）。
（７）司美替尼1的合成 将5 g中间体7及0.94 g氢氧化钠加入至20 mL甲醇中，回流2 h。蒸干溶剂，加入40 mL水，调pH至3-4，抽滤，滤饼干燥后，得米色固体4.3 g，收率为93.8 %。MS （ESI） m/z: 398.0、400.1（M-H）。
将3 g上述产物加入至20 mL氯化亚砜中，回流5 h。蒸干溶剂，得2.8 g黄色固体。立即将其加入至30 mL二氯甲烷中，再依次加入1.5 mL三乙胺和0.6 g 2-氨氧基乙醇，室温搅拌4 h。蒸去溶剂，得浅黄棕色固体，分别用乙醚、冷乙醇洗涤，得白色固体2.8 g，收率为89.7 %，纯度99.1 %。1H NMR （300 MHz， DMSO-d6）: δ 8.29 （s， 1H）， 7.78 （s， 1H）， 7.56 （d， 1H）， 7.23 （dd， 1H）， 6.41 （dd， 1H）， 3.86 （s， 3H）， 3.79 （m， 2H）， 3.49 （m， 2H）。MS （ESI） m/z: 457.1、459.1（M+H）。
２ 结论与讨论
本文主要对司美替尼1的合成方法进行了改进优化，使总收率由13.1%提高至19.2%。在中间体4的制备过程中，未采用原专利中的甲基化试剂三甲基硅烷基重氮甲烷进行甲基化，而是使用浓硫酸及无水乙醇这一体系进行乙基化，考察了浓硫酸、无水乙醇的用量及反应温度对反应的影响，确定了以2.5倍量的无水乙醇作为反应物和溶剂、0.1倍量的浓硫酸作为催化剂和脱水机、回流反应为最佳反应条件，该法在成本、安全性、简化操作等方面均有所改善，更适合工业化生产。在中间体10的制备过程中，原工艺采用氨解、还原、环合、溴代、氯代、甲基化等反应进行合成，除目标产物外，还会有其异构（下转第84页）（上接第51页）体生成，使收率大大降低，且不易纯化；本文采用先甲基化、再环合的方法，避免了异构体的出现，更适合规模化生产。在司美替尼的制备过程中，未采用缩合剂的方法构建酰胺键，而是应用先氯代、再氨解的方法，收率较高、后处理相对简便。
本文最终确定的司美替尼的合成路线与文献方法相比，虽步骤上有所增加，但所用试剂较常用，后处理简单，易于放大，在很大程度上降低了成本，为工业化生产奠定了基础。
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参考文献
［１］邢爱敏.抗肿瘤药Selumetinib[J].药学进展，2012，36（12）:568-569.
［责任编辑：曹明明］
