马玉和1，王庆奎2，郭永军2，尤宏争3，孙学亮2，成希2
（1.天津海升水产养殖有限公司，天津 300270；
2.天津农学院水产科学系，天津市水
产生态及养殖重点实验室，天津 300384；
3.天津市水产研究所，天津 300221）
摘要：以半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis Gunther）为研究对象进行96 h的急性毒性试验，探究甲醛和硫酸铜处理后半滑舌鳎的半数致死浓度（LC50）和安全浓度（SC）。实验结果表明，甲醛处理48 h、96 h后半滑舌鳎的LC50分别为375.68 mg·L-1、351.74 mg·L-1，SC为35.174 mg·L-1；硫酸铜处理48 h、96 h后LC50分别为2.81 mg·L-1、2.58 mg·L-1，SC为0.258 mg·L-1。
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关键词 ：半滑舌鳎；甲醛；硫酸铜；半致死浓度；安全浓度
半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis Gunther）自然资源量少，出肉率高，口感爽滑，味道鲜美，无腥味和异味，高蛋白含量高，营养丰富。目前为我国北方地区的主要养殖品种。
硫酸铜和甲醛是半滑舌鳎养殖中常用药物，但目前甲醛和硫酸铜对半滑舌鳎的急性毒性试验的研究尚未见报道，经常因使用方法不当对其造成伤害，甚至使其中毒死亡。本试验研究了硫酸铜与甲醛对半滑舌鳎的急性毒性试验，以探究这两种药物的安全浓度，从而为实际生产中安全用药提供理论依据。
1材料与方法
1.1试验鱼
由天津海升水产养殖有限公司提供。挑选活力强、外观无伤痕的健康半滑舌鳎作为试验对象，体重为30.5 g±0.2 g。试验前在86 cm×62 cm×45.5 cm的水箱中驯养7 d，每日正常投喂与换水，试验前一天停止投喂。
1.2试验用水
是经生物包系统处理后的海水，水温27.8~28.5 ℃，海水盐度22‰~23‰，pH 7.5~8.2，溶解氧>5 mg/L。
1.3试验方法
1.3.1预试验设置10个浓度梯度，一个对照组，每组20尾鱼，每隔6 h观察死亡率，确定最小致死浓度。
1.3.2正式试验根据预实验结果，正式试验两种药物设置6个浓度梯度组，一个空白组，每组2个平行，每个平行20尾鱼。试验药液现配现用。甲酸试验每8 h换一次水，重新加甲醛；硫酸铜试验12 h换一次水，重新加硫酸铜。采用96 h常温静水试验法，试验开始后6 h连续观察，观察试验鱼中毒后的反应情况，以后每隔12 h观察一次，及时捞出死鱼并记录，测定pH及溶氧。试验结束后统计两种药物24 h、48 h、72 h和96 h的死亡率。当试验鱼鳃盖完全停止活动且对外物刺激30 s内没有产生反应即确定为死亡。
1.4数据处理
半致死浓度由RM6240多道生理信号采集系统图形输出。
2结果与分析
2.1甲醛和硫酸铜对半滑舌鳎的急性毒性试验
甲醛和硫酸铜对半滑舌鳎的急性毒性试验结果见表1、表2。随着甲醛和硫酸铜的浓度逐渐升高、处理时间的延长，半滑舌鳎的中毒症状越来越明显。低浓度甲醛组的半滑舌鳎活动状态基本一致，其与对照组没有明显的区别。随着甲醛浓度的增加，当其浓度为345 mg/L时，48 h之后其中毒症状逐渐明显，浮头并且快速游动、上下乱窜，时快时慢，随着时间的延长，运动能力逐渐渐弱，最后，躺卧于箱底，呼吸衰竭而死，黏液增多。
从表2可以看出，随着硫酸铜浓度的增加死亡率增加。对当硫酸铜浓度达到32.48 mg/L时，鱼体出现短暂的快速游动，而后活动逐渐减弱，呼吸频率减慢，游动缓慢，最终死亡。浓度越高，鱼快速游动时间越短，死亡也就越快。这两组药物死亡的半滑舌鳎鱼体均出现死亡后鱼体发白的现象。
2.2甲醛和硫酸铜对半滑舌鳎的半致死浓度和安全浓度
甲醛和硫酸铜对该鱼的48 h和96 h的半致死浓度（LC50）、LC50的95％置信区间及安全浓度（SC）见表3，从表3可以看出，随着时间的延长，甲醛和硫酸铜对半滑舌鳎的半致死浓度逐渐减小，且在相同时间中其半致死浓度（LC50）均是甲醛组远高于硫酸铜组，这说明不同药物对半滑舌鳎所产生的效应是不同的。具体说来，甲醛对半滑舌鳎要更加安全一些。
3讨论
如今，我国海水的工厂化养殖已经成熟发展，随之而来的是各种病害的频繁出现，特别是由于自然海水不断受到污染，其病害出现了多样性、严重性的趋势。甲醛和硫酸铜是工厂化养殖中的常用药物，但是目前甲醛和硫酸铜对半滑舌鳎的急性毒性试验尚未见报道，所以在养殖过程中，经常会因为使用不当而造成对鱼体的伤害，甚至大面积死亡。为此，针对半滑舌鳎做了甲醛和硫酸铜的96 h急性毒性试验，以期为生产提供安全用药理论依据。
甲醛能与蛋白质作用，并与细胞质结合使其烷基化，从而具有杀菌的效果，尤其是对寄生虫、细菌和病毒等，是工厂化育苗中的常用药物。在对褐牙鲆[1]、红白鲫[2]、方斑东风螺[3]、蓝点笛鲷[4]、淇河仔鱼[5]的急性毒性试验中，其48 h的半致死浓度（LC50）分别为95.941 mg·L-1、71?51 mg·L-1、8.973 mg·L-1、75.958 7 mg·L-1、134.04 mg·L-1，安全浓度分别为0.209 7 mg·L-1、19.23 mg·L-1、0.283 mg·L-1、19?88 mg·L-1、11.94 mg·L-1，这说明不同的鱼对甲醛的敏感度不同，而半滑舌鳎对甲醛的敏感度较低。
硫酸铜作为一种杀虫药物，常在工厂化育苗中得到养殖户的认可。在已有的研究报道中，硫酸铜对淇河仔鱼[6]、金鱼[7]48 h的半致死浓度分别为2.5 mg·L-1、15.85 mg·L-1，安全浓度分别为0.16 mg·L-1、0.912 mg·L-1，而硫酸铜对半滑舌鳎的的48 h半致死浓度为2.81 mg·L-1，说明半滑舌鳎对硫酸铜较敏感。在工厂化养殖中，用甲醛溶液较安全一些。
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参考文献：
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[3] 谢湘筠,张原秋,柯才焕. 甲醛和三丁基锡对方斑东风螺幼体的急性毒性实验[J]. 集美大学学报(自然科学版),2007（04）：306-310.
[4] 施钢,陈刚,张健东,黄建盛,潘传豪,白丽蓉. 4种水产药物对蓝点笛鲷幼鱼急性毒性试验[J]. 南方水产科学,2011（03）:50-55.
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[6] 张月琴,李爱景,金晓璐,李学军. 硫酸铜和高锰酸钾对淇河鲫仔鱼的急性毒性研究[J]. 安徽农业科学,2009（15）:7030-7031.
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